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近期，我中心在处理湖南、安徽3例人感染高致性禽流感病例的过程中，对人禽流感病例标本的采集及实验室检测技术有几点体会，供大家参考。
一、尽早采集病人的呼吸道标本
要及时、规范的采集不明原因肺炎或可疑人禽流感病例的呼吸道标本。最佳采集时间为发病后3天内，如错过最佳时间，仍应尽早采集，一般采集7天内标本。如果第一份标本核酸检测阴性，应立即再次采集呼吸道标本。上呼吸道包括鼻拭子、鼻咽拭子、鼻咽抽提物、鼻洗液、咽漱液；下呼吸道标本包括呼吸道吸取物、支气管灌洗液、肺组织活检标本。下呼吸道标本最有利于分离到禽流感病毒。
标本采集后要在病人床旁或现场分装成一式三份，以防止交叉污染，其中两份送中国疾病预防控制中心进行检测、备份与复核。
二、血清标本
如果没采集到用于核酸检测和病毒分离的急性期标本，人禽流感病例的诊断或排除需双份血清，急性期血清在发病后7天内采集，恢复期血清在发病后第2、3、4周采集。如未能采集到急性期血清，仍应尽早采集第一份血清，并在间隔2～4周后采集第二份血清。采集量要求5ml，以空腹血为佳。
三、对于死亡的可疑人禽流感病例尽可能获得尸检标本
若病人死亡，依据《传染病防治法》，做好病人家属的思想工作，同时提前做好准备，尽早进行解剖，采集肺、气管、肝脏等多器官组织标本。
四、开展人禽流感标本采集和检测工作要达到相应的生物安全要求
采集病人的标本要采取二级防护措施，人禽流感标本的处理、实验室检测要在生物安全二级或三级实验室操作。
五、采取适宜的实验室检测方法
具备资质的各省级实验室首先应用RT-PCR或Real－Time
PCR，对采集的上呼吸道、下呼吸道和尸检标本进行禽流感病毒核酸检测。有条件的省份可进行病毒的分离、鉴定和微量中和试验。
六、标本的保存和送检
用于病毒分离和核酸检测的标本应尽快在24小时内进行检测，24小时能检测的标本可置于4℃保存，如不能于24小时内接种的标本则应置于-70℃或以下保存。血清可在4℃存放3天，-20℃以下长期保存。标本应避免反复冻融。标本的包装上要注明样本编号、姓名及采样日期。符合上送要求的标本要在24小时内送中国疾控中心。
各省需要向中国疾病预防控制中心送检标本时，应先与中国疾控中心疾病控制与应急处理办公室联系(电话、传真：010-83153724)。具体要求见中疾控疾发[2005]526号文件中《疑似人禽流感/不明原因肺炎病例标本送检、接收、检测和结果报告反馈工作流程》。 |
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